TLC를 이용한 중성지방의 분리
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TLC를 이용한 중성지방의 분리
다. 우선 분말 silica gel과 HO를 1:2의 비율로 취하고 75초간 격렬하게 흔든 다음 TLC 스캐너 위의 유리판에 silica gel을 부은 후 밀대로 밀어 TLC 판을 제작하였다.
test(실험) 에서 사용된 흡착제는 silica gel로 sulfuric acid와 sodium silicate의 상호 화학작용으로 형성되며 화학적으로 말하면 수定義(정이) 주component인 silica의 특수형이다. Sample의 조제가 끝나면 petroleum ether-diethyl ether-acetic acid를 70:30:2로 혼합한 용액을 TLC chamber에 넣고 12시간 동안 활성화시킨 다음 TLC 판에 standard와 MG, TG, FFA, Cholesterol, 그리고 sample을 spot한 후 TLC 판을 포화된 TLC chamber에 넣고 전개 시켰다. 實驗결과 Srandard의 Rf값은 0.778과 0.333, MG는 0.059, FFA는 0.481, 콜레스테롤은 0.9259, Sample은 0.689가 나왔다. TLC 판은 다른 이물질이 흡착되지 않도록 잘 말린 다음 활성화시키기 위해 100~200°C에서 30~60분간 가열한 후 desiccator에 보관하였다.
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설명
이번에 실시한 實驗은 TLC(thin layer chromatography)를 이용하여 땅콩의 중성지방을 분리하고 그것이 무엇인지를 알아내는 것이었다. 다음으로 수기를 항량으로 만들어 무게를 잰 후 거름종이에 NaSO를 넣은 상태에서 시료를 걸렀다. Sample을 조제하기 위해 간 땅콩 5g을 삼각플라스크에 취하고 CHCl와 methanol을 1:1로 혼합한 용액 10ml를 가한 후 잘 흔들어주고 20~30분간 방치하였다.
순서
1. test(실험) headline(제목)
2. 요약
3. 서론
4. 재료 및 방법
5. 결과 및 토의
6. reference
크로마토그래피는 물질을 분리하는 좋은 방법으로서 시료 component은 정지상(고정상, stationar
y phase)과 이동상(mobile phase)으로 분배를 반복하면서 고정상 속을 이동하지만 각 component에 의해 그 분배의 비율이 다르면 고정상 속의 이동속도에 차가 생겨 각 component이 분리되어지는 원리를 이용한 방법이다. 다른 하나는 유리판과 같은 판에 정지상을 도포시키고 여기에 이동상을 전개시키는 것으로서 평면 크로마토그래피라 한다. TLC 판은 다른 이물질이 흡착되지 않도록 잘 말린 다음 활성화시키기 위해 100~200°C에서 30~60분간 가열한 후 desiccator에 보관하였다. 이들은 다시 정지상의 종류에 따라 여러 가지로 분류된다 또 크로마토그래피는 test(실험) 하는 방법에 따라 두 가지로 나눌 수 있다아 하나는 유리관과 같은 칼럼에 정지상을 채우고, 여기에 시료를 넣고 이동상으로 사용하는 용매를 용리시키는 방법으로 관 또는 용리 크로마토그래피라 한다. Sample의 조제가 끝나면 petroleum ether-diethyl ether-acetic acid를 70:30:2로 혼합한 용액을 TLC chamber에 넣고 12시간 동안 활성화시킨 다음 TLC 판에 standard와 MG, TG, FFA, Cholesterol, 그리고 sample을 spot한 후 TLC 판을 포화된 TLC chamber에 넣고 전개 시켰다. 다음으로 수기를 항량으로 만들어 무게를 잰 후 거름종이에 NaSO를 넣은 상태에서 시료를 걸렀다. 전개가 다 되면 발색제인 50% HSO를 TLC 판에 뿌린 후 150~180°C에서 가열하여 발색을 시키고 각각의 Rf값을 구하였다.
TLC는 원래 종이 크로마토그래피에서 사용하는 여과지 대신에 유리판에 alumina, silica gel 등을 얇은 층으로 도포한 것을 사용하는 크로마토그래피였으나, 최근에는 유리판을 사용치 않고 기성품인 박층을 사용하는 경우가 많다.
크로마토그래피는 보통 이동상과 정지상에 따라 분류하는데 이동상이 기체일 때는 기체크로마토그래피라고 하며, 액체인 경우는 액체 크로마토그래피라 한다. 그 다음 수기를 Evaporator에 연결하여 용매를 제거하고 수기의 무게를 잰 후 5%의 용액이 되도록 chloroform을 넣어주었다. 생산되는 silica gel은 미세한 구멍들이 서로 연결되어 방대한 그물로 연결된 과립형 비결정상입자이며 광대한 표면적(1g에 300-400m) 에 따른 자연적인 흡착현상과 응축현상으로 물과 알코올, 하이드로카본, 기타 화합물을 흡수하는 흡착능력이 아주 뛰어나며 특히 무색, 무취로서 …(투비컨티뉴드 )
레포트/공학기술
이번에 실시한 실험은 TLC(thin layer chromatography)를 이용하여 땅콩의 중성지방을 분리하고 그것이 무엇인지를 알아내는 것이었다. TLC는 흡착 크로마토그래피의 한 형태로 유리관이나 플라스틱에 silica gel이나 alumina의 얇은 막을 형성시켜 사용하는 방법으로 전개 방법은 종이 크로마토그래피와 유사하고 전개 시간이 짧고, 분리능이 좋다는 특징이 있다. 실험결과 Srandard의 Rf값은 0.778과 0.333, MG는 0.059, FFA는 0.481, 콜레스테롤은 0.9259, Sample은 0.689가 나왔다. 그 다음 수기를 Evaporator에 연결하여 용매를 제거하고 수기의 무게를 잰 후 5%의 용액이 되도록 chloroform을 넣어주었다. 전개가 다 되면 발색제인 50% HSO를 TLC 판에 뿌린 후 150~180°C에서 가열하여 발색을 시키고 각각의 Rf값을 구하였다. 시료의 Rf값을 standard와 비교한 결과 시료의 중성지방은 TG로 판명되었다. Sample을 조제하기 위해 간 땅콩 5g을 삼각플라스크에 취하고 CHCl와 methanol을 1:1로 혼합한 용액 10ml를 가한 후 잘 흔들어주고 20~30분간 방치하였다. 시료의 Rf값을 standard와 비교한 결과 시료의 중성지방은 TG로 판명되었다. TLC는 흡착 크로마토그래피의 한 형태로 유리관이나 플라스틱에 silica gel이나 alumina의 얇은 막을 형성시켜 사용하는 방법으로 전개 방법은 종이 크로마토그래피와 유사하고 전개 시간이 짧고, 분리능이 좋다는 특징이 있다 우선 분말 silica gel과 HO를 1:2의 비율로 취하고 75초간 격렬하게 흔든 다음 TLC 스캐너 위의 유리판에 silica gel을 부은 후 밀대로 밀어 TLC 판을 제작하였다. TLC는 정지상과 이동상 사이에서 흡착으로 평형을 이루므로 흡착 크로마토그래피에 속하고 전개장치, 전개조건은 종이 크로마토그래피와 원리적으로 같으나 전개 시간이 짧고, 분리능이 좋은 것이 특징이다.